ЗАО "МЕДСТАР" | Кальциевый люми-агрегометр

Люминисцентные и импедансные агрегометры корпорации «Chrono-log» позволяют изучать тромбоцитарную функцию в цельной крови в присутствии других клеток и прежде, чем будут разрушены лабильные модуляторы гемостаза. Микрообъем цельной крови - это все, что необходимо для количественного измерения процесса агрегации и секреции. Эти черты делают агрегометры корпорации «Chrono-log» уникальным инструментом не только для клинических, но и для научных исследований. Клеточный ответ на стимулы инициируется изменением цитоплазматического уровня ионизированного кальция. На люминисцентном кальциевом агрегометре можно одновременно измерить поток ионизированного кальция в суспензии аквурин-связанных клеток (аквурин — это люминофор с уникальными свойствами, используемый для детекции любых кальций зависимых событий в крови ) и наблюдать при этом отклик на различные стимулы. Исследования этим методом дают прямые свидетельства о временной связи между процессами мобилизации ионизированного кальция и степенью и полнотой клеточного ответа. Мощный и удобный инструмент исследователя Удобство и многофункциональность агрегометров корпорации «Chrono-log» , и в особенности кальциевого люми-агрегометра, обеспечивает широкий выбор методов всестороннего количественного измерения процессов агрегации. Все методы измерения (оптический, импедансный и люминесцентный ) реализованы в кальциевом люми-агрегометре. Любые образцы могут быть измерены импедансным методом Цельная кровь, разведенная кровь, плазма обогащенная тромбоцитами и отмытые тромбоциты — все эти образцы могут быть измерены с помощью импедансной технологии. Увеличение импеданса прямо пропорциональна тромбоцитарной массе осажденной на специальный электродный блок. Кинетика импеданса позволяет количественно судит о кинетике процесса агрегации. Корпорация «Chrono-log» обладает патентом на примение этого метода. Классичекий усовершенствованный оптический метод В оптическом режиме кальциевый люми-агрегометр использует инфра-красное излучение для измерения изменений формы и процесса агрегации одновременно с люминисцентным измерением. Таким образом, оптическое и люминесцентное измерение производится для каждого образца параллельно. Одной кнопкой на приборе устанавливается полномасштабное сравнение преломления между измеряемым и референтным образцоми. Изменение формы приводит при этом к уменьшению, а агрегационные процессы к увеличению характерного пропускания. Люминисцентный метод для измерения дополнительных параметров - Выброс АДФ измеряется при добавлении реагента Chrono-Lume. (буферизованный раствор люцеферин-люциферазы из светляков ). - Генерация супероксидов лейкацитами измеряется при добавлении к образцу люминола. - Люминисцентный метод используется как уникальный индикатор для кальций-зависимых событий в тромбоцитах. Аквурин — биоиндикатор для биособытий Фотопротеин аквурин излучает свет в голубом спектре пропорционально 2,5 степени концентрации ионизированного кальция. Эта зависимость подтверждена для любых концентраций ионизированного кальция в физиологических пределах. Эта люминисценция специфична только кальцию, но не для каких других катионов в межклеточных концентрациях. Аквурин имеет очень высокую чувствительность и большое отношение полезного сигнала к шуму, малое время отклика и отсутствие какого-либо буферизующего эффекта по отношению к ионизированному кальцию. Аквурин не влияет и не имеет побочных действий на клеточные функции. Многочисленные научные работы показывают, что некоторые кальций-зависимые события очень хорошо фиксируются аквурином, но не другими известными флюорофорами (такими как quin-2 и indo-1). Примеры биособытий хорошо фиксируемых при помощи аквурина - Epinephrine вызывает увеличение цитозолического ионизированного кальция. - Низкие дозы коллагена вызывают, зависимое от дозы, увеличение ионизированного кальция у пациентов при аспирин-терапии. - Форболовый эфир и диацилглицерол вызывает увеличение уровня ионизированного кальция. Этот факт подтверждает, что тромбоцитарная активация, связанная с протеин-киназой-С зависит от уровня ионизированного кальция. - Процессы агрегации и выброс ионизированного кальция ингибируются препаратами Verapamil, Ditiazem и Nifedipine, являющимися блокаторами кальциевых каналов. - При изучении синергизма аквурин показывает увеличение уровня ионизированного кальция, которое не фиксируется при использовании других люминофоров. В присутствии лейкоцитов, и агрегация и активация тромбоцитов, характеризующаяся подъемом уровня цитозолического свободного кальция, усиливается физиологическими стимулами, например, фактором активации тромбоцитов (PAF). Мобилизация резервного кальция и агрегационные процессы наблюдаются также при активации лейкоцитов при помощи N-formyl-methionyl-leycylphenylalanine (fMLP) и leukotriene B4 (LTB4). Эти данные добавляют новые свидетельства, что лейкоцитарно-тромбоцитарные взаимодействия, могут влиять на начало и распространение восполительных процессов, атеросклерозных, тромботических и др. процессов. Методы загрузки аквурина в клетки Аквурин успешно помещается, без микроинъекции, в различные типы клеток, включая лейкоциты, тромбоциты и многие другие. Для этого применяются различные методики. Особенно важно, что при этом клеточные мембраны не повреждаются, а клеточная функция не угнетается. Компьютерные возможности Созданный «Chrono-log» пакет программного обеспечения Aggro/Link. позволяет передавать данные из агрегометра в персональный компьютер. Программное обеспечение работает в среде Windows. Программное обеспечение позволяет автоматизировать процесс сбора и обработки данных, провести все вычисления и распечатать результат на принтер. Подпрограмма обсчета теста ко-фактора Вилебрандта упрощает работу и дает оператору указания по приготовлению стандартных разведений, автоматически строит калибровочную кривую и производит расчет результатов. Калибровочная кривая строится на основе встроенной математической модели наилучшим образом.